三級生物安全柜是為4級實驗室生物安全等級而設計的，柜體*氣密，100%全排放式，所有氣體不參與循環(huán)，工作人員通過連接在柜體的手套進行操作，俗稱手套箱(Golvebox)，試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染，適用于高風險的生物試驗。

　　在允許循環(huán)化學氣體的操作條件下，可以使用外接排放管道蓋（ExhaustCollar）的A2型二級生物安全柜。排放管道蓋與一般硬管不同的是有可吸入空氣的進氣孔；排放管道蓋與外排管道連接，然后接到一個外排風機。排放管道蓋上的進氣孔對于A2型二級生物安全柜通過內置風機保持進氣流和下沉氣流的平衡至關重要。如果使用密封的外接風管，進氣流將會過強可能導致安全柜對產品的保護實效；而排放管道蓋上的進氣孔可以從室內吸入空氣，而不會影響安全柜內的氣流平衡。此條件只適用于微量有毒化學物質。

　　三級生物安全柜有濾膜和風機組成，濾膜的作用：捕捉實驗過程中產生的有毒有害的懸浮顆粒和氣溶膠；風機的作用：提供生物安全柜內受控的風路，防止顆粒和氣溶膠的擴散。

　　全柜的氣流需要在一個合適的范圍內：

　　進氣流過高：可能產生湍流，導致產品保護能力下降，增加能耗；

　　進氣流過低：人員保護性能降低；

　　下沉氣流過高：人員保護能力降低；

　　下沉氣流過低：產品防止交叉感染能力降低。

　　選擇生物安全柜的理由：

　　容易產生氣溶膠的工作行為，對液體或半流體進行搖動、傾注或攪拌操作時，將液體滴加到固體表面上或另一種液體中時，在對瓊脂板劃線接種、用吸管接種細胞培養(yǎng)瓶，采用多道加樣器將感染性試劑的混懸液轉移到微量培養(yǎng)板中，對感染性物質進行勻漿及渦旋振蕩，對感染性液體進行離心，進行動物操作時。